Гост р 52815

У нас вы можете скачать гост р 52815 в fb2, txt, PDF, EPUB, doc, rtf, jar, djvu, lrf!

Характеристика типичных и атипичных колоний - по 8. В посевах на чашках Петри не должно быть менее 15 колоний. Выбирают для подтверждения на каждой чашке Петри пять типичных колоний, если присутствуют только типичные колонии, и пять атипичных колоний, если присутствуют только атипичные колонии, или пять типичных колоний и пять атипичных, если присутствуют оба типа колоний.

Если на чашках Петри, засеянных неразбавленным жидким продуктом или самым меньшим разведением других продуктов, имеется менее 15 типичных и или атипичных колоний, то отбирают все параллельные чашки Петри, на которых имеются типичные или атипичные колонии. Отбирают колонии для подтверждения в количествах, указанных выше. В две другие стерильные чашки Петри вносят по 1 см исходной суспензии жидкого исследуемого продукта или первого десятикратного разведения в случае продуктов другой консистенции.

Повторяют эту процедуру для последующих разведений, используя для каждого разведения новую стерильную пипетку. Посевы заливают Байрд-Паркер агаром с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном или одной из агаризованных сред, указанных в 8. Осторожно перемешивают инокулят со средой и для застывания оставляют чашки Петри в спокойном состоянии на холодной горизонтальной поверхности.

Если необходимо, продолжают инкубирование еще ч. Для подтверждения принадлежности выросших типичных и или атипичных колоний к коагулазоположительным стафилококкам отбирают колонии в соответствии с 8. При выявлении коагулазоположительных стафилококков посевом в или на агаризованную среду подсчета количества колоний не проводят.

Для подтверждения принадлежности к коагулазоположительным стафилококкам у выросших микроорганизмов и отобранных по 8. Коагулазоположительные стафилококки положительно окрашиваются по Граму, имеют шарообразную форму, клетки диаметром 0,,0 мкм, располагающиеся чаще но не всегда в виде скоплений, напоминающих гроздья винограда.

Способность выросших микроорганизмов образовывать каталазу определяют по ГОСТ Коагулазоположительные стафилококки образуют каталазу. Опрокидывая пробирку, исследуют плазму на свертывание после ч инкубирования и, если тест отрицательный, просматривают через 24 ч инкубирования или исследуют после инкубационного периода продолжительностью, установленной изготовителем кроличьей плазмы.

Рисунок 1 - Результаты коагулазного теста. Если и через 24 ч плазма не скоагулировала, то испытуемую культуру стафилококка относят к коагулазоотрицательной. Оценка степени коагулирования плазмы - по 9. При постановке реакции плазмокоагуляции к 0,5 см разведенной плазмы добавляют две капли бульонной культуры. Учет результатов коагуляции плазмы в данном случае проводят в сроки от 30 мин до ч. Если при испытании типичных и атипичных колоний в них обнаружены грамположительные кокки, образующие каталазу, способные коагулировать плазму крови, то считают, что выявленные микроорганизмы относятся к коагулазоположительным стафилококкам.

Принадлежность выявленных коагулазоположительных стафилококков к S. Дифференциация коагулазоположительных видов и подвидов стафилококков по двум признакам - образованию ацетоина и ферментации мальтозы в аэробных условиях приведена в приложении А.

После инкубирования посевов к 1 см отобранной культуральной жидкости прибавляют 0,6 см раствора -нафтола, приготовленного по 5. После прибавления каждого реактива пробирку встряхивают. Появление розового окрашивания через мин указывает на положительную реакцию.

Для определения ферментации мальтозы в аэробных условиях культуры, подлежащие исследованию, высевают уколом петлей в среду Гисса с мальтозой. При ферментации мальтозы в аэробных условиях с образованием кислоты цвет среды Гисса изменяется.

При наличии термостабильной нуклеазы появляется ярко-розовая зона вокруг колодца на синем фоне среды. После инкубирования посевов чашки Петри просматривают в проходящем свете, отмечая наличие зон гемолиза.

Наличие термостабильной нуклеазы и гемолитической активности подтверждает энтеротоксигенные свойства S. НВЧ коагулазоположительных стафилококков или S. Результаты выявления коагулазоположительных стафилококков или S. Результат округляют и записывают по ГОСТ При посеве в Байрд-Паркер агар с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном подтверждения принадлежности к коагулазоположительным стафилококкам не проводят.

В этом случае коагулазоположительными стафилококками на чашке Петри считают все типичные колонии. Формула для подсчета коагулазоположительных стафилококков относится и к подсчету S.

Рассчитанные значения используют для подсчета количества коагулазоположительных стафилококков или S. Согласно ГОСТ для подсчета отбирают чашки, на которых выросло не более колоний, при этом число типичных и или атипичных колоний должно находиться в пределах колоний.

Если в двух последовательных разведениях количество выросших типичных и или атипичных колоний находится в пределах , то в этом случае расчет количества коагулазоположительных стафилококков или S. Результаты определения количества коагулазоположительных стафилококков или S. Для подтверждения было отобрано следующее число колоний: Если высевали 1 см пробы, то результат выражают следующим образом: Результаты оценивают по каждой пробе отдельно. Протокол испытания должен включать: Структура международного стандарта ИСО Обозначение ссылочного межгосударственного и национального стандарта Российской Федерации.

Обозначение и наименование ссылочного международного стандарта и условное обозначение степени его соответствия ссылочному национальному стандарту. Общие правила микробиологических исследований" MOD. Примечание - В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандартов: Электронный текст документа подготовлен АО "Кодекс" и сверен по: Текст документа Статус Сканер копия.

Методы выявления и определения количества коагулазоположительных стафилококков и Staphylococcus aureus Название документа: Методы выявления и определения количества коагулазоположительных стафилококков и Staphylococcus aureus Номер документа: Стандартинформ, год Дата принятия: Данный документ представлен в формате djvu. N ст 4 Настоящий стандарт является модифицированным по отношению к следующим международным стандартам: Таблица 1 Наименование компонента Среда двойной концентрации Среда нормальной концентрации Ферментативный гидролизат казеина 20,0 г 10,0 г Мясной экстракт 10,0 г 5,0 г Дрожжевой экстракт 10,0 г 5,0 г Хлористый литий 10,0 г 5,0 г Маннит 40,0 г 20,0 г Хлористый натрий 10,0 г 5,0 г Глицин 2,4 г 1,2 г Пируват натрия 6,0 г 3,0 г Полиоксиэтилен сорбитан моноолеат твин 2,0 г 1,0 г Вода см см 5.

Методы выявления и определения количества коагулазоположительных стафилококков и Staphylococcus aureus. Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря г.

Горизонтальный метод подсчета коагулазоположительных стафилококков Staphylococcus aureus и другие виды. Метод с применением агаровой среды с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном" ISO Technique using rabbit plasma fibrinogen agar medium", MOD ;.

При этом дополнительные положения и требования, включенные в текст стандарта для учета потребностей национальной экономики Российской Федерации и особенностей российской национальной стандартизации, выделены в тексте стандарта курсивом.

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанных международных стандартов для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1. Сравнение структуры настоящего стандарта со структурой указанных международных стандартов приведено в дополнительном приложении Б. При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам Российской Федерации, использованным в настоящем стандарте в качестве нормативных ссылок, указанным в приложении В.

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра замены или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.

С соблюдением правил асептики прибавляют три раствора. Используют готовую среду непосредственно после приготовления, тем самым избегая преципитации плазмы. Зависит от чистоты бычьего фибриногена. Среда дезаной Среда нормальный. Фермечтитивный тидролизат казвина При нагревании и помешивании растворяют компоненты или дегидратированную основу в воде.

Охлаждают до комнатной температуры и устанавливают рН так. Голодный агар готовят по ГОСТ 1. Наливают в пробирки соответствующего объема. Молочно-солевои загар готовят по ГОСТ Мясопептюмныи агар бульон готовят по ГОСТ Мясопептонный бульон по ГОСТ В мясолептонном бульоне растворяют 6.

В водо растворяют трисаминометан и доводят по ГОСТ Краствору добавляют ДНК, хпористый натрий. Раслэвор доводят водой до метки. Спиртовой раствор готовят по ГОСТ 1. Яично-желтючно-азидныи агар готовят ло ГОСТ Агар с кровью пщатольно перемешивают, избегая вспенивания.

Кровь животных собирают в стерильную посуду со стеклянными бусами и бефобринируют Ny- тем встряхивания в течение 10—15 мин. В результате встряхивания находящиися в крови фибрим выпадает в осадок. Физиологический раствор готовят по ГОСТ Выпускается в сухом виде и готовится по инструкции. Гидроокись калия переносят в морную колбу вместимостью см" и растворяют в воде.

Раствор доводят водой до метки. При нагревании растворяют компононты в воде. Допускается применять одноразовую посуду. Отбор и подготовка проб— по ГОСТ Для посова больших объемов навески испытуемого продукта приготавливают исходную суспензию.

Оставляют минимум воздушного пространства в пробирке или флаконе. Соотношение между количеством высеваемого продукта или его разведением и питательной средой нормальной концентрации 1: При использовании среды двойнои концентрации соотношение между копичеством высеваемого продукта или его разведением и питательной средои 1: Если при последующем подтверждении принадпожности коэгулазоположительных стафилококков к 5.

При испытании высококисротных продуктов для предотвращения резкого снижения рН на 0. Количество добавляемого раствора гидроокиси натрия ипо величину. Долускается доводить рН до ноитрального значения с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия в самом высококислпотном продукте. Содержание хлористого натрия МаС] в посевах ие должно быть более 6. Байрд-Паркер агара с кроличьеи ппазмой и бычьим фибриногеном, молочио-солового агара, яично-желточно-азидного агара или яично-желточно-сопевого агара см.

Пересовы проводят также из пробирок, в которых нет видимых признаков роста. Если на поверхность Жиолитти-Кантони бульона наслаивали голодный агар или парафин, то перед пересовом с соблюдением правил асепгики их удаляют, используя для этого стерильный шпатель. Шпатс- лем режут слой агара на четыре части вдоль и. На Байрд-Паркер arape после инкубирования в течение 24 ч коагулазопопожительные стафипококки образуют типичные колонии черного или серого цвета блестящие и выпуклые.

После инкубирования в течение 24 ч непосредственно около колонии в прозрачной зоне может появиться опапес- цирующее кольцо.

На Баирд-Паркер агаре с кроличьейя плазмой и бычьим фибриногеном коагулазоположительные стафилококки образуют черныев или серые, или ровные белые мелкие колонии.

На молочно-сопевом агаре колонии ковгупазопопожительных стафипококков круглые. Атипичные колонии на Байрд-Паркер агаре могут представлять одну из следующих морфопогии:. Для подтверждения принадлежности отобранных типичных и атипичных колоний к хоагулазоположительным стафилококкам пересевают каждую отобранную колонию отдельно в жидкую среду. Готовят такое чиспо разведений.

Осторожно перемешивают инокулят со средом. Подготовка Жиолитты-Кантони бульона к посеву, создание анаэробных условий для роста микроорганизмов — по 8. Переносяг с помощью стерильной пипетки 0,1 —0. Байрд-Паркер агар с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном используют дпя посева сильно обсемененных продуктов. Для посева продукта или каждого его разведения используют две параллельные чашки Петри со средой.

Если необходимо, повторяют процедуру для исходного разведения. Для посева в качество арбитражнои среды используют Баирд-Паркор агар. По 1 см1 высевают на поверхность среды в одной большой чашке Петри диаметром мм либо на поверхность среды в трех маленьких чашках Потри диаметром 90 мм. В обоих случаях высевают параллельные навески. Примерно в течение 15 мин дают подсохнуть поверхности среды под крышками по ГОСТ Характеристика типичных и атипичных копонии — по 8.

Для подсчета берут чашки Петри, на которых выросло максимум колонии. В посевах на чашках Петри не должно быть менее 15 колоний. Выбирают для подтверждения на каждой чашке Петри пять типичных копонии. Если на чаш- ках Петри. Отбирают копонии для подтверждения в количествах. В две другие стерильные чашки Петри вносят по 1 см: Повторяют эту процедуру для последующих разведений. Посевы заливают Байрд-Паркер агаром с кроличьей плазмой и бычьим фибриноганом или одной из агарбизованных сред. Осторожно перемешивают инокупят со средой и для застывания оставляют чашки Петри в спокойном состоянии на холодной горизонтальной поверхности.

Если нообходимо, продолжают инкубирование еще 18—24 ч. Для подтверждения принадлежности выросших типичных и или атипичных колоний к коагулазоположительным стафилокожкам отбирают колонии в соответствии с 8.

You Might Also Like